當前位置：TSZ Elisa試劑盒在一項新的研究中，來自美國、巴西、尼加拉瓜和德國的研究人員開發(fā)出一種新的技術而使得通過捕捉和測試蚊子來監(jiān)控寨卡病毒（Zika virus, ZIKV）傳播能夠變得更加快速和更加低廉。這種基于環(huán)介導等溫擴增反應（loop-mediated isothermal amplification, LAMP）的檢測方法能夠區(qū)分寨卡病毒亞洲毒株和非洲毒株，而且在理論上可能被用來在現場直接檢測蚊子中可能存在的寨卡病毒。
美國普渡大學的Richard Kuhn（未參與這項研究）說，“你能夠僅是捕捉蚊子，將它們磨碎，或者獲得被感染者的血液樣品和其他類型的樣品，隨后直接檢測寨卡病毒是否存在。你不必進行RNA純化，你也不必執(zhí)行逆轉錄步驟，因而真正地簡化這個過程。”
隨著寨卡病毒感染在新的地方出現，TSZ Elisa試劑盒利用一種廉價的簡易的現場檢測方法可更加簡單地監(jiān)控蚊子、進行診斷和鑒定寨卡病毒毒株。
正如聚合酶鏈式反應（PCR）那樣，LAMP利用序列匹配的引物擴增靶DNA序列。但是不同的是，PCR需要讓反應試劑混合液不斷循環(huán)地經歷不同的溫度，而LAMP是在恒定的63° C下進行的。這意味著無需購買價格在.5萬美元到2萬美元的PCR熱循環(huán)儀，而僅需構建250美元的加熱塊（heat block）。
寨卡病毒是一種RNA病毒，擴增它的核酸需要先通過逆轉錄步驟將其轉化為DNA。一種逆轉錄酶執(zhí)行這種轉化，并被用于RT-PCR和逆轉錄-環(huán)介導等溫擴增反應（RT-LAMP）之中。但是已存在一些證據證實用于LAMP測定中的嗜熱脂肪芽孢桿菌（Bacillus stearothermophilus）DNA聚合酶也能夠發(fā)揮著逆轉錄酶的作用。確實，Rovnak已發(fā)現這種酶的逆轉錄酶活性是“非常令人印象深刻的”，這意味著它能夠同時執(zhí)行DNA轉化步驟和擴增步驟。
Rovnak說，省掉這個逆轉錄步驟和使用簡單的加熱塊，當然會讓這種檢測比RT-PCR測定更加廉價和便于攜帶。但是，如何首先分離寨卡病毒RNA？Rovnak也有一種簡單的現場友好的解決方案。
這種方案就是僅需磨碎攜帶寨卡病毒的蚊子，將它們加入到含有LAMP反應試劑的試管中，在63° C下孵育，Rovnak團隊能夠強健地擴增寨卡病毒RNA。在5只感染上寨卡病毒的蚊子中，他們能夠準確地全部檢測到，而且在3只未感染上寨卡病毒的蚊子中，他們均未檢測到這種病毒的存在。
考慮到將這種測定方法用于病人診斷，Rovnak團隊接著直接擴增來自被感染者的血漿、血清的寨卡病毒亞洲毒株，不過這也會產生一些假陽性和假陰性。Rovnak說，這是由于“尚不確定的抑制物質”。
TSZ Elisa試劑盒在這種LAMP方法能夠成為一種診斷工具之前，它需要更一步的開發(fā)，但是鼓舞人心的是，它是與RT-PCR那樣是穩(wěn)健的、準確的和敏感的，但是試劑成本下降了“大約一半”。
